RESUMO Escherichia coli diarreiogênicas (DEC) e patogênicas para aves (APEC) são associadas a infecções intestinais e extraintestinais (ExPEC), respectivamente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a sensibilidade antimicrobiana, a presença de genes que codificam os fatores de virulência relacionados à DEC e APEC, e a classificação filogenética em E. coli isoladas de 320 amostras de ração para frangos e ingredientes. A sensibilidade antimicrobiana foi determinada pelo método disco-difusão e calculou-se o índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA) e a resistência a múltiplas drogas (MDR). Nas amostras que possuíam genes de virulência relacionados à DEC e/ou APEC, foi realizada a classificação filogenética. Foram isoladas 110 amostras de E. coli em 15% (49/320) dos insumos avaliados (n=13 farelos vegetais; n=33 farinhas de origem animal; n=3 rações). De forma geral, os isolados apresentaram as maiores frequências de resistência antimicrobiana à sulfonamida e à cefazolina e 18% (20/110) foram resistentes a múltiplas drogas. O IRMA das rações foi o mais alto (0,467). Os genes que codificam fatores de virulência associados à APEC e DEC foram detectados em seis e cinco isolados, respectivamente, pertencentes aos grupos filogenéticos A e B1. Os resultados demonstram a necessidade de rigoroso controle microbiológico durante o processo de produção desses alimentos.

ABSTRACT Diarrheagenic (DEC) and avian pathogenic Escherichia coli (APEC) are associated with intestinal and extra-intestinal infections (ExPEC), respectively. We aimed to analyze the antimicrobial susceptibility, gene encoding virulence factors associated to DEC and APEC, and phylogenetic classification in E. coli isolated from 320 samples of feed and ingredients. Antimicrobial susceptibility was performed using the disk diffusion method and Multiple Antibiotic Resistance (MAR) Index and Multi-Drug Resistance (MDR) were calculated. Phylogenetic classification was performed on samples harboring DEC and/or APEC virulence-associated genes. A total of 110 E. coli strains were isolated in 15% (49/320) of the evaluated inputs (n=13 vegetable meal; n=33 animal meal, n=3 feed). In general, the isolates showed the highest rates of antimicrobial resistance to sulfonamide and cefazolin and 18% (20/110) were multi-drug resistant. MAR index of feed samples was the highest (0.467). Six and five strains had APEC and DEC virulence-associated genes, respectively, and belonging to phylogenetic groups A and B1. These findings point to the need for strict microbiological control during the production process of these foods.

Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium são responsáveis por imensos prejuízos econômicos ao setor avícola, podendo levar ao desenvolvimento de doença clínica e ao aumento da mortalidade em aves jovens. A patogenicidade de Salmonella é considerada complexa e multifatorial, necessitando de estudos que possam esclarecer a interação entre patógeno e hospedeiro. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a virulência de 130 isolados de S. Enteritidis e 70 de S.Typhimurium, inoculadas em pintos de um dia de idade, por meio do estabelecimento de um índice de patogenicidade. Para cada cepa, foram utilizados 10 pintos comerciais da linhagem Cobb. As aves foram inoculadas com 200µL de uma solução contendo 2x108 UFC de S. Enteritidis ou S. Typhimurium, por via intraperitoneal. A mortalidade e a presença de lesões como aerossaculite (A), peri-hepatite (Ph), pericardite (Pc), peritonite (Pt), onfalite (O) e celulite (C) foram registradas diariamente durante sete dias. Do segundo ao sétimo dia, houve uma diminuição proporcional da pontuação no tempo de morte (TM) a cada dia em que o animal sobrevivia. O cálculo do índice de patogenicidade de cada pintinho inoculado (IP) obedeceu à seguinte fórmula: IP = (TMx5) + A + Ph + Pc + Pt + O + C. Para obtenção do IP de cada amostra, foi realizada a média do IP obtido com as 10 aves inoculadas. Com base nos resultados observados, foi possível atribuir um valor de patogenicidade a cada uma das cepas, permitindo classificá-las em grupos de baixa (27/200), intermediária (95/200) e alta patogenicidade (78/200). A utilização de critérios, como tempo de morte e presença de lesões septicêmicas, permitiu a determinação de um índice de patogenicidade para cada cepa. Além disso, o modelo proposto apresentou diferença significativa entre os grupos de alta, intermediária e baixa patogenicidade, permitindo, assim, a sua aplicação para classificação futura das cepas isoladas em granjas avícolas.

Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium are responsible for causing huge economic loses in aviculture, as they lead young broiler chicks to develop clinical disease and thus increase mortality. Salmonella's pathogenicity is considered complex and multifactorial, demanding more studies that could elucidate the interaction between host and pathogen. The present study aims to evaluate the virulence of 130S. Enteritidis isolates and 70S. Typhimurium inoculated in one-day-old chicks through the establishment of a pathogenicity index. For each strain, 10 commercial chicks from the Cobb lineage were used. Then, 200µL of a solution containing 2x108 CFU of S. Enteritidis or S. Typhimurium were inoculated in the birds by intraperitoneal via. Mortality and presence of lesions such as aerosaculitis (A), perihepatitis (Ph), pericarditis (Pc), peritonitis (Pt), onfalitis (O) and cellulitis (C) were registered daily for seven days. From the second to the seventh day there was a proportional decrease in the punctuation of the time of death (TD) for each day that the bird had survived. The pathogenicity index was calculated using the following formula: PI = (TD x 5) + A + Ph + Pc + Pt + O + C. The obtainment of the PI of each bacterial sample was achieved by calculating the rate of the ten inoculated birds. Based on the obtained results, it was possible to attribute the pathogenicity value for each strain, which enabled us to classify them in groups of low (27/200), intermediate (95/200) and high (78/200) pathogenicity. The utilization of standards like time of death and presence of septicemic lesions made it possible to determine the pathogenicity rate for each strain. Besides that, the proposed model has presented dramatic differences between the high, intermediate and low pathogenicity groups, which makes this mechanism useful for further classification of strains isolated in poultry farms.

Twenty-four goat semen samples were collected and divided into four aliquots, diluted with the citrate-egg yolk (CY), TRIS-egg yolk (TY) or industrialized coconut water with egg yolk (ICW-Y) extenders. The fourth aliquot was centrifuged to analyze fructose concentration and PLA2 activity on SP. The semen was stored at 5ºC and evaluated at times fresh, 2, 24 and 48 h, in each time was evaluated the vigor, sperm motility and total morphological alterations. The animals were divided into two groups: group Ifructose concentration >710 mg/dL and group IIfructose concentration <480 mg/dL. The ICW-Y extender presented inferior results. The effect of the group was observed only in the ICW-Y. CY and TY worked similarly in the two groups. No significant difference in the activity of PLA2 was found between the groups. However, ICW-Y should not be used for the storage of goat semen.

Foram coletadas 24 amostras de sêmen caprino. Cada ejaculado foi dividido em 4 alíquotas, e foram diluídas em citrato-gema de ovo (CG), TRIS-gema de ovo (TG) e água de coco industrializada-gema de ovo (ACI-G), a quarta, foi centrifugada para determinação da concentração de frutose e atividade da FLA2 no PS. O sêmen foi conservado a 5 ºC e avaliado a fresco, 2, 24 e 48 h, em cada tempo foi avaliado o vigor, motilidade e alterações morfológicas. Os reprodutores foram divididos em dois grupos: grupo I-concentração de frutose >710 mg/dL e o grupo II-concentração de frutose <480 mg/dL. O sêmen diluído em ACI-G apresentou resultados inferiores. O efeito de grupo foi observado apenas no sêmen diluído em ACI-G. CG e TG funcionaram de forma similar nos dois grupos. Nenhuma diferença na atividade da FLA2 foi encontrada entre os grupos. Por outro lado, a ACIG não deve ser utilizada para a conservação do sêmen caprino.

RESUMO Os métodos moleculares de detecção rápida e eficaz de lotes de aves infectados por bactérias como Salmonella sp. Campylobacter sp. e Listeria monocytogenes são importantes para reduzir a frequência da transmissão destes patógenos entre os lotes de aves e aos consumidores de produtos de origem animal. Recentemente, as técnicas de biologia molecular, em especial a reação em cadeia polimerase, que permite a amplificação específica de segmentos de DNA, têm possibilitado novos rumos na identificação de bactérias supracitadas, reduzindo o tempo de cultivo e ampliando a confiabilidade das provas diagnósticas. A utilização da biologia molecular por laboratórios de diagnóstico humano e animal, assim como em programas de controle de qualidade de alimentos e produtos de origem animal, já é realidade e tende a se expandir rapidamente. O objetivo deste artigo é fazer uma breve revisão dos testes diagnósticos convencionais e moleculares para identificar Campylobacter sp., Salmonella sp. e Listeria monocytogenes. Concluindo, o diagnóstico molecular é um campo em avanço científico e tecnológico, no qual novas técnicas moleculares estão em desenvolvimento para o diagnóstico de bactérias em alimentos.

ABSTRACT The molecular methods for quick and efficient detection of chicken lots infected by bacteria such as Salmonella sp. Campylobacter sp. and Listeria monoytogenes is basic for the effort to reduce the frequency of the transmission between chicken lots and to the consumers of poultry products. Recently, the development of techniques involving molecular biology, especially polymerase chain reaction, which allows the specific enlargement of segments of DNA, has been making new procedures possible for the identification of the abovementioned bacteria, reducing the time necessary for the tests and enhancing the reliability of the resulting diagnoses. The use of molecular biology in laboratories for human and animal diagnosis, as well as in quality control programs for foods and products of animal origin is already a reality and has tended to expand quickly. The objective of this article is to present a brief review of the conventional diagnostic and molecular tests for the identification of Campylobacter sp., Salmonella sp. and Listeria monocytogenes. In conclusion, molecular diagnosis is a field undergoing scientific and technological advancement, in which new molecular techniques are under development for the diagnosis of bacteria in foods.

Estragole, a relatively nontoxic terpenoid ether, is an important constituent of many essential oils with widespread applications in folk medicine and aromatherapy and known to have potent local anesthetic activity. We investigated the effects of estragole on the compound action potential (CAP) of the rat sciatic nerve. The experiments were carried out on sciatic nerves dissected from Wistar rats. Nerves, mounted in a moist chamber, were stimulated at a frequency of 0.2 Hz, with electric pulses of 50-100-µs duration at 10-20 V, and evoked CAP were monitored on an oscilloscope and recorded on a computer. CAP control parameters were: peak-to-peak amplitude (PPA), 9.9 ± 0.55 mV (N = 15), conduction velocity, 92.2 ± 4.36 m/s (N = 15), chronaxy, 45.6 ± 3.74 µs (N = 5), and rheobase, 3.9 ± 0.78 V (N = 5). Estragole induced a dose-dependent blockade of the CAP. At 0.6 mM, estragole had no demonstrable effect. At 2.0 and 6.0 mM estragole, PPA was significantly reduced at the end of 180-min exposure of the nerve to the drug to 85.6 ± 3.96 and 13.04 ± 1.80% of control, respectively. At 4.0 mM, estragole significantly altered PPA, conduction velocity, chronaxy, and rheobase (P <= 0.05, ANOVA; N = 5) to 49.3 ± 6.21 and 77.7 ± 3.84, 125.9 ± 10.43 and 116.7 ± 4.59%, of control, respectively. All of these effects developed slowly and were reversible upon a 300-min wash-out. The data show that estragole dose-dependently blocks nerve excitability.